兒童毛發(fā)中微量元素測定方法學(xué)的研究

1.儀器與試劑

1.1 儀器

TAS-990 原子吸收分光光度計 LWP-500 型微量移液器

1.2 試劑

Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液（1mg/ml）各一份，硝酸（優(yōu)級純）；雙氧水（優(yōu)級純）。

2.樣品

采用隨機抽樣的方法抽取自愿接受微量元素檢測的 3~7歲健康兒童 90 名，用不銹鋼剪從每個(gè)研究對象頭枕部發(fā)根處各剪取不帶發(fā)囊的頭發(fā)約 2g，分別裝入取樣袋內，以待檢測。

3.測定方法

樣品預先經(jīng)過(guò)硝酸 - 雙氧水處理后，采用原子吸收分光光度計測定 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 元素的吸光度值。

3.1 樣品的預處理

將每份發(fā)樣預先使用洗滌劑浸泡，用蒸餾水沖洗后，再使用去離子水反復沖洗，于 60℃在烘箱中干燥 3 小時(shí)。從每份干燥后的發(fā)樣中各準確稱(chēng)取 0.5 克樣品，置于 100ml 的燒杯中，加入硝酸 - 雙氧水（HNO3：H2O2=1：1）50ml，小火加熱至近干并使之完全消化、冷卻，用 2%硝酸溶液溶解稀釋?zhuān)�轉移至 10ml 的容量瓶中，定容待測。

3.2 標準曲線(xiàn)的繪制

精密量取 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液 1ml 于 10ml 容量瓶中，各加 2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，稀釋成 100μg/ml 的標準液。再分別精密量取 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml 經(jīng)上述稀釋過(guò)的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液于 10mL 容量瓶中，并各加2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，放置待測。

4.統計方法

采用 SPSS 13．0 統計軟件進(jìn)行數據分析，計量資料晝夜微量元素平均含量，比較用 t 檢驗。

5.結果

5.1 標準曲線(xiàn)的線(xiàn)性關(guān)系

取預先配制好的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液，測定各自吸光度與濃度關(guān)系，繪制標準曲線(xiàn)，分別如下圖。

5.2 精密度試驗

取預處理后樣品 10 份，按照上述方法消化后，在與繪制標準曲線(xiàn)相同的條件下測定每一樣品發(fā)樣中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種元素的的濃度，計算平均值和相對標準偏差，見(jiàn)表 1。

5.3 加樣回收率試驗

取預處理后樣品 10 份，其中 5 份分別加入定量的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種微量元素標準液，分別測定其中微量元素含量，數據見(jiàn)表 2。5.4 晝夜差異分析取預處理后樣品 5 份，每份樣品分別在晝夜測定微量元素的含量，連續測定 3 日，分析晝夜條件對測定結果的影響，數據見(jiàn)表 3。上述數據經(jīng)統計學(xué)軟件處理，結果表明被測樣本經(jīng)上述處理后較為穩定，晝夜差異分析無(wú)顯著(zhù)性差異（P＞0.05）。

6.討論

目前，國內學(xué)者對人頭發(fā)微量元素的研究較多，但對頭發(fā)中微量元素的測定方法研究開(kāi)展不多，尤其是對采用原子吸收分光光度法測定兒童發(fā)樣中微量元素的研究報道更為少見(jiàn)。有文獻報道采用原子吸收法測定微量元素，具有快速、簡(jiǎn)便、準確等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗研究采用原子吸收分光光度法測定 90 例自愿接受檢測的 3~7 歲健康兒童頭發(fā)中的微量元素，探討該方法測定頭發(fā)微量元素的可行性及穩定性。實(shí)驗研究結果表明，原子吸收分光光度法測定微量元素其吸光度和濃度成正相關(guān)，線(xiàn)性依存關(guān)系較好，由精密度和回收率試驗證明采用該方法進(jìn)行微量元素測量試驗的系統誤差和偶然誤差發(fā)生率較低，試驗過(guò)程中受外界因素干擾較小，實(shí)驗室環(huán)境以及儀器工作條件穩定，儀器操作、試液配制等正確可行。通過(guò)晝夜差異分析可知，采用原子吸收分光光度法進(jìn)行發(fā)樣中微量元素測量，實(shí)驗過(guò)程不受時(shí)間影響，在不同的時(shí)間段本試驗均進(jìn)展順利。本研究不僅確定了原子吸收分光光度法在不同環(huán)境下進(jìn)行兒童頭發(fā)中微量元素檢測是切實(shí)可行的，監測數據準確，測定條件穩定可靠，而且為今后關(guān)于頭發(fā)微量元素測定的相關(guān)課題及其他同類(lèi)實(shí)驗研究提供參考。

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